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一、病理切片服务在分子实验中的重要性
病理切片服务在分子实验中占据着至关重要的地位。以往，病理医生主要依据组织学形态观察病理切片来做出病理诊断。然而，随着分子诊断技术的不断发展，完整的病理诊断不仅包括分子诊断，还涵盖了基因检测和后续的靶向治疗。因此，病理切片成为了病理诊断的关键环节。
病理切片的重要性在多个方面得以体现。首先，它是病理中最重要的环节之一。病理医生可以通过选择相应的分子诊断，利用特殊的分子检测对病理切片进行分级和分类。在必要时，还能进行基因筛选，为患者的靶向药物治疗提供有力帮助。
在病理学实验教学中，病理切片同样具有重要作用。它是学生认识和掌握病理变化的直接载体和有效途径，具有很强的直观性与实践性。正确认识病理切片，明确其中的重点观察对象，并结合多媒体课件的应用，能够显著提高病理实验教学效果，以及学生运用病理学知识分析疾病的能力。
传统的病理实验教学存在诸多弊端，凸显了病理切片服务的重要性。例如，玻璃切片数量少，不能满足教学需求，且在教学过程中容易损坏。质量过关的玻璃切片制作步骤繁琐，保存稍有疏忽就易被毁损或褪色，影响典型病变的观察和示教精确度。对于一些罕见病变，成型的组织切片数量不足，无法满足学生学习需要。此外，随着医学生数量的增加，实验课上显微镜病变观察教学受时空限制，学生对显微镜下的病变组织特征和典型病变定位识别困难，传统的纸质实验报告难以达到掌握相关知识点的目的。
相比之下，数字病理切片具有诸多优势。数字病理切片图像清晰，含有整张玻璃切片的全部信息，能在鼠标操纵下完成无极变倍连续缩放浏览，并提供切片全景导航，有利于学生理解局部与整体的关系，还能实现切片的定量分析和标注等后期处理。数字病理切片易于保存和管理，方便浏览和传输，可在不同地点被很多学生浏览，教学效率显著提高。同时，数字病理切片结合显微数码互动实验室的使用，可以使师生间的互动交流更加便利，提高病理实验课教学水平，增进学生学习兴趣。
二、传统病理实验教学的不足
（一）教学资源和设备受限
在传统病理实验教学中，学生必须在固定场所借助显微镜观察切片，这使得教学资源和设备的利用受到很大限制。一方面，实验室的显微镜数量有限，难以满足众多学生同时进行观察的需求。另一方面，这种教学方式无法培养学生的自主学习能力，学生只能在特定的时间和地点进行学习，缺乏灵活性和主动性。
（二）切片易损坏和褪色
长时间保存的玻璃切片会出现褪色、损坏等问题，这对病理实验教学产生了诸多不良影响。首先，褪色和损坏的切片会影响学生对病变的观察，降低教学效果。其次，罕见病例的素材本来就难找，而一旦玻璃切片出现问题，就更难以满足教学需求。例如，一些特殊的病理变化可能只有在特定的切片中才能观察到，但由于切片的损坏或褪色，学生可能无法看到这些关键的病变特征。
（三）切片差异影响教学
同一病变的玻璃教学切片可能存在差异，这给病理实验教学带来了很大的困扰。不同的切片可能在病变的表现程度、染色效果等方面有所不同，这使得学生在观察时容易产生困惑，影响教学效果。此外，收集适合教学的典型病理切片也较为困难，因为病变的多样性和复杂性使得找到具有代表性的切片成为一项艰巨的任务。
（四）病变定位困难，教学效率低
学生在显微镜下观察切片时难以准确找到病变部位，这是传统病理实验教学中的一个突出问题。由于学生对病理切片的不熟悉以及显微镜操作的不熟练，他们往往需要花费大量的时间来寻找病变部位。而教师在指导学生时，也因为学生数量众多而难以做到全面、及时的指导，导致教学效率低下。例如，在实验课上，教师可能需要同时指导几十名学生，无法对每个学生的问题进行详细解答，这就使得学生在病变定位上更加困难。
（五）实验报告难以达到教学目的
传统书面纸质实验报告因学生绘图能力差异等原因，难以反映病变本质，难以达到掌握知识点的目的。在传统病理实验教学中，学生通常需要通过绘图来描述观察到的病理变化。然而，由于学生的绘图能力参差不齐，一些学生可能无法准确地描绘出病变的特征，从而影响了实验报告的质量。此外，单纯的绘图也难以全面地反映病变的本质，使得学生在完成实验报告的过程中，难以真正掌握病理知识点。
三、数字化病理切片的优势
（一）图像清晰，便于学习
数字病理切片具有图像清晰的显著优势，其包含了整张玻璃切片的全部信息。学生在学习过程中，能够通过鼠标操纵实现无极变倍连续缩放浏览，并可借助切片全景导航，更好地理解局部与整体的关系。此外，数字切片还能进行定量分析和标注等后期处理，这为学生提供了更深入的学习方式，有助于他们更好地掌握病理知识。例如，在观察细胞结构时，学生可以将图像放大到特定倍数，清晰地看到细胞的各个细节，从而更好地理解病理变化。同时，教师也可以利用数字切片的这些功能，对重点部位进行标注，引导学生进行有针对性的学习。
（二）易于保存和管理
与传统的玻璃切片相比，数字切片易于保存。玻璃切片存在不易储存保管、易褪色易损坏易丢片等问题，而数字切片则可以有效地解决这些困扰。数字切片可以存储在计算机或服务器中，不受物理空间的限制，也不用担心褪色和损坏。即使经过长时间的保存，数字切片依然能够保持清晰的图像质量，为教学和研究提供可靠的资料。例如，一些珍贵的病理切片可以通过数字化的方式永久保存，避免了因玻璃切片损坏而导致的资料丢失。
（三）方便浏览和传输
数字切片的方便浏览和传输特性极大地提高了教学效率。同一张切片可在不同地点被很多学生浏览，打破了时间和空间的约束。学生不再局限于实验室的显微镜前，可以在任何有网络连接的地方通过电脑、平板或手机等设备查看数字切片。这使得教学资源得到了更充分的利用，尤其对于远程教学和学生自主学习具有重要意义。例如，学生在假期或实习期间，也能够随时访问数字切片进行学习，提高了学习的灵活性和自主性。
（四）互动交流便利
数字病理切片结合显微数码互动实验室，为师生间的互动交流提供了极大的便利。在传统教学中，学生在显微镜下观察切片时难以准确找到病变部位，而教师在指导学生时也因学生数量众多而难以做到全面、及时的指导。但在数字病理切片的环境下，学生能迅速找到病变部位，教师可以进行集体示教及答疑。例如，教师可以通过数字切片系统将某个典型病变部位展示给所有学生，并进行详细的讲解和分析，学生也可以随时提出问题，与教师和同学进行交流讨论，从而提高学习效果。
四、病理切片服务流程
（一）病理标本接收
病理标本接收是病理切片服务的首要环节。这一过程包括标本登记和初步处理。在接收标本时，工作人员会认真核对病理送检单及标本瓶签上的患者信息，如姓名、性别、年龄、送检科室等，同时检查送检医生名字是否为全名以及病史是否记录完整。若信息不符或不全，则会退回。此外，还会观察送检标本的大小及固定液比例是否合适，对于穿刺活检及纤支镜所取的小标本，固定组织的量应在 6 - 10 倍；对于较大的手术切除标本，应及时切开固定。标本接收后，会将病理申请单和标本编上病理标本号，并将病人的各项信息逐项录入电脑存储，同时进行文字登记，为后续的病理学检查和档案保存奠定基础。
（二）标本固定
标本固定是确保病理切片质量的关键步骤。通常选择合适的固定液浸泡标本使其固定，其中中性福尔马林是一种常用的固定液，如乳腺癌术后标本固定常使用中性福尔马林。福尔马林是 37% - 40% 的甲醛水溶液，具有强烈的刺激性气味，可以使蛋白质变性，从而起到固定组织的作用。癌细胞标本通常也使用福尔马林固定液进行固定，它能有效地固定细胞和组织，并保持其形态和结构。在固定过程中，需要确定并控制固定时间以保证标本质量，一般标本从离体到固定的时间不应超过半小时，以免干涸影响制片。对于空腔标本和大的实质性脏器标本须及时切开、固定过夜，空腔或含气的肿瘤性病变，应沿肿瘤对侧剖开；大的实质性脏器每间隔 1cm 做连续书页状切开，剖开处用纱布隔开，及时用固定液浸泡。对于需要送冰冻的组织，则无需浸泡，应取新鲜组织直接送到病理科。
（三）组织脱水
组织脱水是病理切片制作的重要环节。逐步使用不同浓度醇溶液进行组织脱水，通常将固定后的组织样本逐渐浸泡到浓度递增的酒精溶液中，从低度酒精（如 70%）到高度酒精（如 100%）。脱水剂主要是通过渗透压差来提取组织中的水分。此外，自动组织脱水机为组织脱水提供了有效手段，其处理过程包括 AAF 液加强固定、梯度乙醇脱水、透明、浸蜡等步骤。例如，TC - 120 型智能程控生物组织自动脱水机的程序为：AAF 液加强固定 2 小时；85% 乙醇 2 小时，95% 乙醇 3 缸各 2 小时，无水乙醇 2 缸各 1 小时；透明：二甲苯 2 缸各 30 分钟；浸蜡：纯石蜡 3 缸各 1 小时，温度为 60℃ - 65℃。
（四）其他步骤
病理切片会诊步骤：病理切片会诊的步骤因医院而异，一般包括提交病理切片、缴费、医师询问病史、医师会诊、领取结果几个步骤。患者或患者家属需要携带外院的病理切片及病理报告、病历等资料，并将这些资料提交至会诊医院的收发室。然后根据会诊医院的具体规则进行缴费。缴费后等待医师询问病史，相应的医师进行病理切片会诊，作出诊断。一般情况下在提交病理切片的三个工作日后领取会诊结果，如果需要进行其他的检查辅助诊断，则需要的时间会相应延长。
病理切片服务内容及价格：具体的病理切片服务内容和价格因不同医疗机构和服务项目而有所差异。一般来说，服务内容包括标本接收、固定、脱水、切片、染色、读片、报告等环节。价格方面，可能会根据标本类型、检查项目的复杂程度等因素进行定价。患者在选择病理切片服务时，可以向医疗机构咨询详细的服务内容和价格信息，以便做出合理的选择。
五、分子实验病理切片服务关键步骤
（一）不同组织的关键步骤
淋巴结组织：
取材：淋巴结组织具有结构致密、细胞丰富的特点，取材时切取的组织厚薄要均匀，一般以 0.2 - 0.3cm 为宜。
固定：淋巴结都有一层比较致密的结缔组织被膜，不利于液体与这些组织的相互渗透，固定时间需延长 6 - 12 小时，或固定一夜，第二天与常规组织一起进行脱水。如用中性甲醛固定和乙醇脱水，时间都要延长一倍，可适当缩短二甲苯透明时间。
切片：要求的组织厚度在 2 - 3μm，故切片组织易碎，展片时皱褶不易打开、有裂隙、不平整。蜡块不应冻得过久，冻后的蜡块修到最大面时用拇指沾温水捂 5 - 6 秒后快速用冰块冰 3 - 4 秒立即切片，这样切出的片子既完整，又无裂隙，且连片。
展片：水温在 35℃左右，过高则小皱褶打不开，过低则切片不平坦，贴片不牢易脱片。
染色：染苏木精时应比常规时间短，一般 3 - 5 分钟即可，也可以单设置一种染色程序专门用于淋巴结等实性组织的染色。
脂肪组织：
固定与浸蜡：脂肪组织内充满脂肪滴，不易被脱水剂完全溶解，石蜡也不能完全浸透，故组织不能被固定。因此，固定和浸蜡时间相对延长是关键，取材也不宜过厚。
切片：切片时修至最大面后，用冰块贴到蜡块上冰 5 - 10 秒后再立即切片，低温可暂时使未脱透的脂肪滴凝固，从而切出较完整的组织。切片厚度可调整为 5 - 6μm。
裱片与捞片：速度要快，裱片温度不易超过 42℃。
骨髓及骨组织：
脱钙：骨髓及骨组织制片中脱钙是关键。骨髓组织常采用 7% 盐酸水溶液脱钙，因送检的骨髓组织硬度不同，时间很重要。时间太短组织较硬，切片时不连片；时间太长组织发灰影响诊断。骨髓组织在脱钙液中漂起即可，一般为 2 - 5 分钟。骨组织在切片前也要经脱钙处理，常用的脱钙液是 17% 硝酸水溶液，时间为 12 - 24 小时，或用大头针能扎透为准。
切片：切片前蜡块一定要慢修、薄修，尤其对较薄的骨片，这样切片时骨组织不会被切掉。
烤片：时间要相对延长，以防脱片。
皮肤组织：
脱水：皮肤组织结构复杂，层次多，且各层之间的组织致密程度各不相同，可相对延长脱水时间。
包埋：皮肤及皮下组织要包在同一个面上，这样才能切出皮肤的层次。
切片：将蜡块内皮肤组织表层朝上夹在切片机夹口上，按照皮肤组织的特点由里至外，最后切角质层，这样才可制作出比较完整的切片。
烤片：因角质层密度最大、易碎，烤片时间可相对延长以防止脱片。
脑组织：
取材：一般组织取材厚度小于 2mm，组织脱水不好会影响浸蜡，可适当延长脱水时间。
切片：容易粘刀、皱褶不易打开，因此要在冰箱冻的时间长一些，切片方法同淋巴结组织。
展片：可先放在凉水中将小皱褶完全打开，再用载玻片移到展片机中充分展片。
烤片：时间不宜过长。
（二）通用注意事项
使用新刀片：应先切小组织或淋巴结等实性组织，后切脂肪、肌肉等组织，最后切骨组织。
修蜡块与切组织：不要在同一个刀位进行，在一边修好蜡块后移到另一边切片，这样既省刀又能保证质量。
烤片前控水：最好将刚捞起的切片靠在烤片机边上控水后再烤片，否则水会将组织推散，破坏其完整性。
自动化机器操作：可按设置要求恒定制片工作中的温度、时间、程序，避免手工操作中的不稳定因素。
试剂管理：一张优质病理切片的固定、脱水、包埋、切片固然重要，但这些步骤保障的是所用试剂的稳定性。应有专人进行试剂的检查、配制、更换和调整，对试剂的浓度、剂量、使用时间、稳定性等都按时记录，以保证质量。
