一、动物实验的常规项目
动物学实验内容丰富多样,涵盖了多个方面。其中常规项目包括:
显微镜的使用及观察草履虫等基础实验,通过对草履虫的外部形态、临时装片制作、内部构造、运动、食物泡形成、伸缩泡生理活动、刺丝泡发射、对酸刺激的反应以及生殖的观察,掌握显微镜的构造和使用方法,了解生物的分界及动物在生命世界的地位,初步掌握动物分类的基本知识,了解动物科学研究的新动态。
多孔、腔肠和扁形动物装片与浸制标本的观察,在显微镜下观察海绵骨针装片、水螅过卵巢装片、薮枝螅装片、涡虫横切装片、涡虫消化道装片、日本血吸虫雌雄虫合抱装片、华枝睾吸虫装片、猪囊尾蚴装片、猪肉绦虫成熟节片等,理解多孔、腔肠和扁形动物的主要特征。
蛔虫和环毛蚓的解剖与观察,学习蠕形动物的一般解剖方法。观察蛔虫的外形和内部结构,包括消化系统、生殖系统、横切面玻片;对环毛蚓进行外形观察、解剖以及观察消化系统、循环系统、生殖系统、神经系统、横切面玻片。通过比较蛔虫和环毛蚓,了解环节动物的进步性特征,及动物形态、器官系统结构与机能逐渐演化发展和完善的进化过程,进一步熟悉线虫动物门、环节动物门的主要特征。
河蚌的解剖,了解软体动物门的基础知识。观察河蚌的外形,进行解剖,并观察消化系统、循环系统、排泄系统、呼吸系统、生殖系统,理解软体动物适应性特征。
河蚌、田螺和乌贼切片观察实验也是动物学实验的一部分。该实验包括河蚌的外形观察及内部解剖,对蚶、牡蛎、贻贝扇贝、珍珠贝、三角帆蚌等浸制标本的观察;活田螺外部形态观察和内部解剖,对芋螺、蛞蝓、蜗牛、钉螺、椎实螺浸制标本的观察;乌贼浸制标本的观察以及示教蚌鳃切片、钩介幼虫装片的观察。
动物学河蚌系列实验实验报告详细记录了河蚌的解剖与观察过程。包括实验目的和要求、实验条件、实验原理和方法、实验步骤设计、内部构造观察、钩介幼虫的观察以及实验小结等内容。
通过对河蚌的解剖和观察,可以了解河蚌的内部结构和特点,为后续的实验和研究提供基础数据。实验采用解剖法,准备好材料后,选择新鲜、健康的河蚌,用解剖刀切开,暴露内部器官和组织,进行观察和记录,并绘制成图表或表格,最后将解剖后的河蚌残骸用实验纸包好并做好标签。
二、疯狂的动物实验案例
历史上曾有许多令人震惊的动物实验,这些实验在一定程度上推动了科学的发展,但也引发了关于动物权益的争议。
癌症研究人员让青蛙皮肤变透明:2007 年,日本广岛大学的癌症研究人员培育出透明青蛙。这些青蛙的内脏可以通过透明的皮肤完全看到,这一创新减少了解剖的次数,因为研究人员可以直接观察青蛙的内部器官和血管。日本还培养过透明的老鼠。
被注射过的蜘蛛织网实验:1995 年,美国宇航局的科学家研究各种物质对蜘蛛织网能力的影响。正常的蜘蛛编织了一个看起来不完整,却是正常的网;服用兴奋剂的蜘蛛编织得又快又差;服用迷幻剂的蜘蛛编织了一个分散、低效的网;而喝了咖啡因的蜘蛛,蜘蛛网偏离了中心而且不对称。
小水母被送入太空:1991 年,多萝西?斯潘根伯格博士正在研究失重对人类胎儿的潜在影响,选择将 2478 只小水母送上 “哥伦比亚号” 航天飞机发射至太空。最初,水母很好地适应了环境,繁殖到 6 万只。但回到地球上后,新水母被发现有比平常更严重的 “脉搏异常”。
猴子的头移植实验:20 世纪 70 年代早期,美国研究人员罗伯特?怀特进行了世界上第一次成功的猴头移植手术。猴子醒来后咬伤外科医生,仅存活 9 天。2016 年,神经外科医生塞尔吉奥?卡纳维罗又成功地进行了猴头移植手术,移植后的猴子只存活了 20 个小时。
软骨细胞在老鼠背上长人耳:1997 年,老鼠背上长出了不成比例的人耳形状组织,该研究目的是为了改进整形手术的技术。赘生物最终被移除,老鼠继续过着 “正常生活”。
黑猩猩像人类小孩一样被抚养长大:1931 年,心理学家温斯洛普?凯洛格把一只名叫瓜的小雌黑猩猩,带到家里和小儿子唐纳德一起抚养。瓜在测试中表现良好,但无法掌握语言技能,还阻碍了唐纳德的发展。九个月后实验结束,瓜被释放到动物聚居地。
无头狗实验:1940 年,苏联医生谢尔盖?布鲁科年科发明了一种心肺机,让一条无头狗活了下来。他把实验对象的头展示给苏联科学家们看,头在指示下退缩、眨眼甚至吃了一块奶酪。
救活狗的实验:1934 年,加州大学的研究员罗伯特?科尼什作为 “拉撒路计划” 的一部分,将患病的狐狸梗放入自制机器中循环血液并加入肾上腺素和抗凝血剂,救活了两只狗。虽然它们大脑受到严重损伤但存活了好几个月,科尼什也因此被大学开除。
为注射可乐的老鼠播放爵士乐实验:2011 年,研究人员把老鼠放在房间里,先播放贝多芬的曲子,老鼠似乎更喜欢安静的音乐。之后老鼠定期被注射液体可乐一周,它们的口味从古典音乐变成了爵士乐。
三、动物实验基本技术服务及定制项目
动物实验的基本技术服务及定制项目涵盖多个方面,为科学研究提供了有力支持。
1. 基本技术服务:如标记、注射、灌胃等
动物实验中,基本技术服务包括标记、注射和灌胃等操作。标记可以采用颜料标记、烙印、纹身、号牌、毛色、剪毛、打孔等方法,对动物进行编号,便于识别和管理。注射是将药物、试剂等注入动物体内的重要手段,包括皮下注射、皮内注射、腹腔注射、静脉注射等。灌胃则是将药物、营养液等通过胃管注入动物胃内,常用于口服给药的研究。这些基本技术服务需要熟练的操作技巧和严格的无菌操作,以确保实验的准确性和可靠性。
2. 药理学、毒理学、药代动力学实验:包括抗肿瘤药物、肿瘤动物模型建立实验
药理学、毒理学和药代动力学实验是动物实验的重要组成部分。在抗肿瘤药物研究中,常通过建立肿瘤动物模型来评估药物的疗效和安全性。肿瘤动物模型可以采用化学诱导、移植瘤、基因工程等方法建立,模拟人类肿瘤的发生、发展和治疗过程。通过对肿瘤动物模型进行药物治疗,可以研究药物的抗肿瘤作用机制、药效学、药代动力学等方面的问题。此外,毒理学实验可以评估药物的毒性和安全性,为药物的临床应用提供参考。
3. 多抗、单抗的制备实验
多抗和单抗的制备实验是动物实验中的重要技术。多抗制备通常采用免疫动物的方法,将抗原注入动物体内,激发动物的免疫反应,产生多克隆抗体。单抗制备则需要通过杂交瘤技术,将免疫动物的 B 细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。多抗和单抗在医学、生物学等领域具有广泛的应用,如疾病诊断、治疗、研究等。
4. 动物胚胎、精子冷冻、移植实验
动物胚胎和精子冷冻、移植实验是动物繁殖和保种的重要手段。精子冷冻可以将雄性动物的精子保存下来,以备后续使用。胚胎冷冻则可以将动物的胚胎保存下来,用于繁殖或研究。移植实验可以将冷冻的精子或胚胎移植到受体动物体内,实现动物的繁殖或保种。这些技术在动物遗传资源保护、动物育种等方面具有重要意义。
5. 转基因与基因敲除鼠制作实验:提供转基因小鼠定制服务和基因敲除小鼠定制服务,包括服务内容、流程、收费标准等
转基因与基因敲除鼠制作实验是动物实验中的高级技术。转基因小鼠定制服务可以将外源基因导入小鼠受精卵中,使其在小鼠体内表达,从而研究外源基因的功能。基因敲除小鼠定制服务则可以通过基因打靶技术,将小鼠体内的特定基因敲除,研究该基因的功能缺失对小鼠的影响。这些服务包括服务内容、流程和收费标准等方面。服务内容通常包括课题商谈、实验设计、基因操作、小鼠培育等环节。流程包括签订合同、提供材料、进行实验、鉴定结果、结算费用等步骤。收费标准则根据实验的复杂程度和所需材料的成本等因素确定。
四、常见的动物实验项目类型
生理实验:研究动物生理系统运作,通常使用小型哺乳动物。例如,在生理学实验中,常使用猫、豚鼠等动物进行神经、循环和呼吸方面的实验。猫的神经系统和循环系统较发达,与人很相似;豚鼠性情温顺,对各种刺激有较高的反应,对抗生素极为敏感。此外,小白鼠也是生理实验常用的动物,其基因和人的基因有 80% 极为相似,生理反应和人体也极为相似,且繁殖能力强、体型小易控制、价格便宜,适合进行各种生理实验,如对循环系统、呼吸系统、消化系统等进行深入研究。
药理实验:评估新药的有效性和安全性,大型哺乳动物常用于此类实验。药理实验旨在评估新药的有效性和安全性,以及确定药物的剂量和给药方式。通常使用大型哺乳动物,如狗和猴子进行实验。同时,也有使用小型哺乳动物进行药理实验的情况,如大鼠和小鼠常用于病理实验和行为实验,也可用于药理实验,以研究药物对动物的作用和效果。
病理实验:研究动物疾病模型,小型哺乳动物为主要实验对象。病理实验主要研究动物疾病模型,包括对癌症、糖尿病、关节炎等进行深入研究。小型哺乳动物如大鼠和小鼠是病理实验的主要实验对象,此外,家兔、豚鼠等也可用于特定疾病模型的研究。例如,糖尿病动物模型在减重代谢外科基础研究中,常用大鼠作为实验动物,如肥胖糖尿病型的 ZDF 大鼠、非肥胖糖尿病型的 GK 大鼠等,通过不同的造模方法构建糖尿病动物模型,以研究糖尿病的发病机制和治疗方法。
行为实验:探索动物行为和认知过程,常用小型哺乳动物。行为实验是研究动物行为和认知过程的实验,常用小型哺乳动物如大鼠和小鼠进行实验。例如,水迷宫实验、Y 迷宫实验、避暗穿梭跳台实验、大小鼠高架十字迷宫实验、孔板实验、八臂迷宫实验、Y 型迷宫、新物体识别实验、旷场实验等都是常见的行为学实验,用于测试动物的空间学习和记忆能力、短期记忆、焦虑和活动水平、运动协调性和耐力、抑郁或无助感等。
生态学实验:研究动物在自然环境中的行为和适应性,可在野外或实验室进行。生态学实验研究动物在自然环境中的行为和适应性,既可以在野外进行,也可以在实验室中进行。例如,可以通过观察动物的食物链关系、繁殖行为、迁徙等,了解动物在自然环境中的生存状态和适应机制。同时,也可以在实验室中模拟自然环境,进行生态学实验,以研究动物的行为和适应性。
五、常用的动物行为学实验
水迷宫实验:测试动物空间定位和方向感学习记忆能力。水迷宫实验是一种强迫实验动物(如大鼠或小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的实验。其利用了动物的一种 “探索” 和 “更替” 的倾向,当它们离开一个臂时,总是倾向于跑向之前未跑过的 “新” 臂。由于小鼠不愿意在水中,因此会寻找能爬出水面的阶梯。经过训练后,小鼠能够记住找到阶梯的路线。水迷宫除用于学习、记忆试验,也可用于抗疲劳试验。水迷宫自动记录仪由迷宫游泳箱和自动记录仪两部分组成。水温一般保持在 22 - 26℃左右,开启自动记录仪,调试好摄像头,设置好记录参数,记录动物在水迷宫中的错误次数和到达终点需时间等数据。训练阶段包括引导动物熟悉迷宫和正式训练过程,重复训练让动物自行寻找出口或目标区域,自动记录仪会记录动物的游泳路径、速度、寻找目标所花费的时间等数据。记录行为阶段记录动物在寻找隐藏目标过程中的各种行为数据,包括搜索时间、游泳轨迹复杂程度等。
Y 迷宫实验:观察动物的逃避条件反射能力和工作记忆能力。Y 迷宫也称三等分辐射式迷路箱,由等长的三个臂和交界区组成,各个臂夹角 120 度。将小鼠放在 Y 迷宫中间处,自由探索迷宫 8 min,视频分析系统记录总进臂次数和连续进入三个不同臂的次数,并按公式计算交替百分比。Y 迷宫主要应用于动物的辨别性学习、工作记忆及参考记忆的测试,相对其他迷宫实验而言,具有简便性、可行性、实用性,现常用于学习记忆功能评价。与 T 迷宫相比,T 大小鼠 T 迷宫实验是一个类似字母 T 形的结构,通过观察小鼠或大鼠在 T 迷宫中的行为,研究人员可以评估其认知能力、空间记忆和学习能力;Y 迷宫主要应用于动物的辨别性学习、工作记忆及参考记忆的测试,由三个完全相同的臂组成,每个臂尽头有食物提供装置,根据分析动物取食的策略即进入各臂的次数、时间、正确次数、错误次数、路线等参数可以反映出实验动物的空间记忆能力。
高架十字迷宫实验:测量动物焦虑行为。高架十字迷宫由两条相对开放臂和两条相对闭合臂及中央区连接而成。测试前小鼠先放在空旷地自由活动 5min,小鼠头朝开臂方向放入中央区域,记录 5min 内小鼠进入开放臂进入次数、停留时间,闭合臂进入次数、停留时间,并计算开放臂停留时间比例,开放臂进入次数比例。进入开放臂次数及停留时间与小鼠的焦虑情绪成负相关,进入开放臂次数越少,停留时间越短,说明小鼠的焦虑情绪越严重。其原理是由于面对新事物开臂,小鼠会产生好奇心去探究,而它们有嗜暗的天性(闭臂),两者之间发生探究与回避的冲突行为,产生焦虑心理。整个迷宫距离地面的高度相当于人类站在悬崖边,易导致动物产生恐惧不安的心理。可以通过对比小鼠在开臂和闭臂内的滞留时间和路程来评价小鼠的焦虑行为。
蔗糖偏好试验:检测动物快感是否缺失。蔗糖偏好测试是一项简单的任务,用于评估啮齿动物模型中的动机,抑郁(和快感不足)以及相关的情绪状态。实验包括适应训练部分和测试部分。在训练中,为动物提供两瓶饮用溶液,一瓶用蔗糖加糖,一瓶为普通饮用水,定期交替放置两个瓶子的位置。可以在一整天或选定的时间段内测量蔗糖的偏爱,通过计算消耗的溶液总毫升数或每克体重消耗的蔗糖克数等方式来评估结果。老鼠或大鼠必须处于单笼条件下才能进行蔗糖偏爱测试,以提供准确的测量结果。
强迫游泳实验:评价啮齿类动物模型的抑郁类行为。将小鼠放入装有干净水的圆柱容器内,水深 30cm,水温 25±1?C,强迫小鼠游泳,用摄像系统记录小鼠 6 min 内后 4 min 内不动状态持续时间。不动状态是指动物放弃主动挣扎,躯体处于漂浮不扭动状态。小鼠不动:被动的漂浮在水上,微微拱起但竖直状态,鼻子在水面上,不动时间越短,表明药物的抗抑郁作用越强。
六、十大动物行为学经典实验
悬尾实验:评估小鼠抑郁样态。悬尾实验是一种经典的评估抗抑郁药物、兴奋药物、镇静药物药效的方法。其原理是将实验动物的尾部固定,使其头部向下悬挂,动物在该环境中挣扎后会出现间断性不动,显示 “行为绝望” 状态。实验过程中记录动物不动时间来反映抑郁状态,抗抑郁药物、兴奋药物能明显缩短这种不动状态。目前有专门的悬尾测试仪,适用于大鼠、小鼠等动物,通过记录处于该环境的动物产生绝望的不动状态过程中的一系列参数,来评估药物效果。该实验在抑郁方面的研究很受关注。
社会交互行为实验:探究小鼠在社会环境中的行为表现。社会交互行为测试是最常用的用于评估自闭症行为的实验。在实验中,检测小鼠靠近位于实验箱中装有另一只陌生小鼠的金属笼的时间,来判断小鼠的社交能力。通常会比较小鼠靠近关有熟悉小鼠的金属笼时间与陌生小鼠金属笼的时间。检测指标包括活动距离、运动速度、测试时间等通用指标,各区域运动路程、逗留时间等区域指标,束缚鼠间的接触次数、接触持续时间等特色指标以及轨迹图等其他指标。
华东师范大学心理与认知科学学院蒯曙光团队利用虚拟现实技术结合经典心理物理学方法,首次定量化测量了人类之间的交互行为,并提出社会交互场模型以及用于解释人类社会知觉分组的基本算法。该研究利用虚拟现实设备,调控两个虚拟人物的距离、角度,实验对象在操作过程中产生的数据可作为判断其交互行为的指标。研究结果提示人际距离、角度更接近的两个个体有较大概率被试判断为一个社会群组。
交互行为课程设计中,教学目标包括使学生掌握交互行为的基本概念、原则和技巧,能够运用所学知识分析和解决实际问题。教学内容涵盖交互行为的概念和分类、交互设计原则、交互行为的应用等。教学方法采用讲授法、案例分析法、实验法、讨论法等多种方式。教学资源包括教材、参考书、多媒体资料和实验设备等。教学评估通过平时表现、作业和考试等方式全面客观地评价学生的学习成果。同时还设计了差异化教学、教学反思和调整、教学创新、跨学科整合和社会实践和应用等环节,以提高教学质量和学生的学习效果。
孔板实验:反映小鼠自发活动程度。孔板实验是利用新奇和恐惧两个因素来控制动物在新环境下的行为,用逃避来反映这两个因素的作用结果。动物反复钻头反映其新奇感和对逃避的渴望。一般认为,药物在不影响动物运动活性的剂量下,增加钻头次数和时间,表现为抗焦虑作用,减少钻头次数和时间则为致焦虑作用。
大鼠和小鼠的实验装置有所不同。大鼠装置为一个 66cm x 56cm x 47cm 的木箱,底板有 4 个直径为 3.8cm、深 1 cm 的等大圆孔;小鼠木箱为 44cm x 40cm x 27cm,4 个孔的孔径均为 3cm,厚 1.8cm。实验时将动物置于孔板中央,背朝观察者,记录 5 - 10min 的钻头次数及钻头持续时间。
在进行孔板实验时,需注意箱体尺寸调整、孔板设计变化、实验时间控制以及药物评估综合性等问题。
高架十字迷宫实验:测量动物焦虑反应。高架十字迷宫由两条相对开放臂和两条相对闭合臂及中央区连接而成。其原理是由于面对新事物开臂,小鼠会产生好奇心去探究,而它们有嗜暗的天性(闭臂),两者之间发生探究与回避的冲突行为,产生焦虑心理。整个迷宫距离地面的高度相当于人类站在悬崖边,易导致动物产生恐惧不安的心理。可以通过对比小鼠在开臂和闭臂内的滞留时间和路程来评价小鼠的焦虑行为。
实验前要确保高架十字迷宫整个装置的清洁,实验动物提前运送到行为学实验室专用临时笼架适应环境至少 3H 左右。将实验动物放在仪器宫体的中央区域,动物面向开臂,然后实验员迅速安静离开。打开动物行为分析软件,跟踪动物在高架十字迷宫仪器内的轨迹运动,自动计算指标,通常实验时长为 5min。实验结束后,取出实验动物,放入饲养笼,做好标记信息,并用酒精和纸巾清洁迷宫。
实验指标包括进入开放臂次数、开臂活动、进入闭臂次数、闭臂活动、向下探究次数、闭臂后腿直立次数和中央区域活动等。
八臂迷宫实验:评估动物学习记忆能力。(暂缺具体内容)
水迷宫实验:评估实验动物空间定位和方向感学习记忆能力。水迷宫实验是强迫实验动物游泳,学习寻找隐藏在水中平台的实验。利用动物的 “探索” 和 “更替” 倾向,当它们离开一个臂时,总是倾向于跑向之前未跑过的 “新” 臂。由于小鼠不愿意在水中,因此会寻找能爬出水面的阶梯。经过训练后,小鼠能够记住找到阶梯的路线。
水迷宫除用于学习、记忆试验,也可用于抗疲劳试验。水迷宫自动记录仪由迷宫游泳箱和自动记录仪两部分组成。水温一般保持在 22 - 26℃左右,开启自动记录仪,调试好摄像头,设置好记录参数,记录动物在水迷宫中的错误次数和到达终点需时间等数据。训练阶段包括引导动物熟悉迷宫和正式训练过程,重复训练让动物自行寻找出口或目标区域,自动记录仪会记录动物的游泳路径、速度、寻找目标所花费的时间等数据。记录行为阶段记录动物在寻找隐藏目标过程中的各种行为数据,包括搜索时间、游泳轨迹复杂程度等。
动物跑台实验:评估动物运动能力和研究运动对生理功能的影响。(暂缺具体内容)
Y 型迷宫实验:评估啮齿类动物空间学习和记忆能力。Y 迷宫也称三等分辐射式迷路箱,由等长的三个臂和交界区组成,各个臂夹角 120 度。将小鼠放在 Y 迷宫中间处,自由探索迷宫 8 min,视频分析系统记录总进臂次数和连续进入三个不同臂的次数,并按公式计算交替百分比。Y 迷宫主要应用于动物的辨别性学习、工作记忆及参考记忆的测试,相对其他迷宫实验而言,具有简便性、可行性、实用性,现常用于学习记忆功能评价。
新物体识别实验:研究实验动物认知功能和记忆能力。(暂缺具体内容)
旷场实验:研究小鼠行为和情绪。旷场实验被用作一般运动活动的度量,通过客观地监测运动参数,对比动物在旷场内部运动时间、运动速度及运动距离对实验动物的自主运动进行评估。研究表明,小脑共济失调模型小鼠表现为运动距离下降,活动降低,运动能力下降。