番红-固绿染色

番红-固绿染色(软骨)在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中，常需联合使用多种染料以显示其组织学结构。其中，起源于上世纪60年代的番红O(safranin O)-固绿(fast green)染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织的结构而备受青睐。软骨呈红色，成骨呈绿色。

技术原理

番红-固绿（软骨）染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨和碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或者蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织和骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨收到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可以对番红O染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合，不宜褪色。

实验步骤

实验结果展示：

<番红固绿-骨>

注意事项

1、注意固绿的上色程度，番红不要掩盖绿色。

2、切片分化时间应恰当，以背景呈绿色为宜。分化过度容易导致切片不着色，分化不足容易导致切片着色过深。

送样运输要求：

1、植物样本置于20倍样本体积的FAA固定液中固定24h以上，常温运输送样。

2、切勿冷冻结冰。