一、引言
小鼠灌胃给药是动物实验中常用的操作方法,但对于初学者来说可能存在一定难度。本文将详细介绍小鼠灌胃给药的操作步骤、技巧及注意事项,帮助读者成功进行小鼠灌胃给药。
小鼠灌胃给药在动物实验中具有重要意义,它可以准确地将药物给予小鼠,以便研究药物的作用效果、代谢过程等。然而,由于小鼠体型较小且较为活跃,灌胃操作需要一定的技巧和经验。
首先,需要关注的只有两点:一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线,方便灌胃针头进入;二是动作要轻柔,从口角进入,防止损失食道。做的多了自然就熟练了。具体操作过程如下:
准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到,实在没有的话,可以用 12 号的针头,剪去针尖,用砂纸将头端磨平,也可以用。但是买的灌胃针头的头端用锡或者适宜的方法处理了针头的锐口,自己用砂纸不可能将所有的锐口都磨掉,用这样的针头灌胃,损失小鼠食道的可能性比较大。
抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单,左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴,另外三个手指抓住小鼠的颈部即可。因为小鼠始终在活动中,若一次抓的感觉不是很顺手,要放开重新抓,不要逞强进行下一步操作。
抓好小鼠就可以灌胃了,一般用 1ml 的注射器配灌胃针头。灌胃针头从小鼠的嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进,进入食管后会有一个刺空感,进入食道后就可以推注药液了。(我认为,所谓的灌胃,不必要灌胃针头进入小鼠的胃部,进入食管后就可以推药了,这样对小鼠食道的损伤要小点,特别是要长期灌胃给药的情况下。)当然,灌胃针头也可以再往里面深入一点,防止药液从口中流出。
灌胃容积一般是 0.1~0.2ml/10g,最大 0.35ml/10g,每只小鼠的灌胃最大容积不超过 0.8ml。
经验总结:
在操作过程中最重要的是小鼠的固定。把小鼠放在笼子上,右手捏住它的尾巴,它会扒住笼子伸长身体,然后左手拇指和食指捏住它颈部皮肤(不用太用劲,保证它不能回头就行),其余三指抓住背部,就可以把它固定住了。注意头一定要固定好,头和躯体要保持一条直线,并且灌胃时使小鼠成竖直位,头向上。
我们用的灌胃剂量是 0.2ml/10g。开始时试过 0.1ml/10g,灌完后小鼠立即俯卧喘息,大概是撑着了,后改用 0.2ml/10g,灌完后小鼠没有明显不适。
把握要领,动作尽量迅速,减少小鼠的不适感。
小鼠灌胃剂量:0.1ml/10g 体重,也就是说,一只 20g 的小鼠,一般一次灌胃 0.2ml。
灌胃的方法与技巧对了,一般不会有问题。比如说抓小鼠的姿势(小鼠的身体最好伸展在一条直线上,不能让它乱动,要固定);还有,一定要用灌胃针灌胃(灌胃针的针尖部分是弯曲的);另外就是技巧上的问题了,进针时要从小鼠的嘴角进去,进去后让灌胃针顺着小鼠的上腭压着它的舌头进入食道,这当中会有种突破感,突破感过后就畅通无阻了,液体灌进去一点阻力也没有,若有阻力的话,那就说明你灌错地方了,取出灌胃针再来过,多练几次就熟练了,这还是很好练的。祝你好运!另外,灌胃的动作不能太粗鲁,一定要轻柔!
20g 的小鼠灌胃一天一次,只要操作得当不会被灌死。灌胃针可用 12# 注射器针头,磨平尖端,点焊为钝圆形。也有卖的灌胃针,如苏州市苏杭实验动物设备厂(0512-65621455)。
操作前将灌胃针安在注射器上大致测量一下从口腔到胃内的位置(最后一根肋骨后缘)的长度,根据此距离确定插入深度,成年小鼠插入大约 3 厘米。成年小鼠每次最大可灌 1.0 毫升。
最重要的是手法,感觉和熟练程度。固定好小鼠,身体最好伸展在一条直线,太松会动,太紧就把小鼠脖子勒住了。一般沿口角进针,抵达咽部会有抵触感,小鼠会有吞咽动作,此时阻力丧失,就可继续下行了。信息来源:丁香通。
二、操作步骤
1. 准备灌胃针头
市场上有多种规格的灌胃针头可供选择,如在阿里巴巴平台上,共 87 件老鼠灌胃针相关产品,有小鼠灌胃针灌胃器鼠针号号号大鼠灌胃针直针弯针不锈钢等,价格从几元到上百元不等,大小鼠灌胃针批发锡头小鼠灌胃针小动物灌胃 8 号 10 号 12 号型号齐全,复购率较高。同时,也可以自己制作灌胃针头,用 12 号针头剪去针尖并磨平,但买的灌胃针头处理锐口更安全,自己处理可能损伤小鼠食道。
2. 抓住小鼠
左手小指和无名指抓尾巴,另外三个手指抓颈部,使头、颈和身体呈一直线。若抓不顺手,应放开重新抓。抓小鼠的动作要轻柔,因为小鼠始终在活动中,一次抓的感觉不顺手时不要逞强进行下一步操作。
3. 进针给药
用 1ml 注射器配灌胃针头,从嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻推进。进入食管后有刺空感,即可推注药液,也可再深入一点防止药液流出。灌胃针头从小鼠的嘴角进入时,动作要轻柔,防止损伤食道。进入食管后若有刺空感,说明针头已进入正确位置,可以推注药液。如果对插入深度不确定,可以像一些操作方法中提到的那样,操作前将灌胃针安在注射器上大致测量一下从口腔到胃内的位置(最后一根肋骨后缘)的长度,根据此距离确定插入深度,成年小鼠插入大约 3 厘米。在推注药液过程中,要注意观察小鼠的反应,若有阻力,可能是灌错地方了,应取出灌胃针重新操作。推液时动作宜轻柔,防止对小鼠造成不必要的伤害。
三、技巧总结
1. 小鼠固定
把小鼠放在笼子上,右手捏尾巴,左手拇指和食指捏颈部皮肤,其余三指抓背部,固定好小鼠,头和躯体保持直线,灌胃时使小鼠竖直,头向上。这样固定小鼠可以确保在灌胃过程中,小鼠不会乱动,便于操作。同时,保持头和躯体成直线,能使灌胃针更容易顺着小鼠的口腔进入食道,减少对小鼠的伤害。
2. 确定剂量
灌胃容积一般是 0.1 - 0.2ml/10g,最大 0.35ml/10g,每只小鼠最大不超过 0.8ml。如 20g 的小鼠一般一次灌胃 0.2ml。在确定灌胃剂量时,需要根据小鼠的体重进行计算,避免剂量过大导致小鼠不适甚至死亡,也不能剂量过小影响实验效果。同时,不同实验可能对剂量有不同要求,需要根据具体情况进行调整。
3. 动作要领
进针时要从小鼠嘴角进,顺着上颚压着舌头进入食道,动作轻柔迅速,有突破感后畅通无阻,若有阻力说明插错地方需重新操作。在进行灌胃操作时,从小鼠嘴角进针可以减少对小鼠口腔的损伤。顺着上颚压着舌头进入食道,能确保灌胃针进入正确的位置。动作轻柔迅速可以减少小鼠的不适感,避免引起小鼠过度挣扎。当感觉到有突破感后,说明灌胃针已进入食道,此时可以顺利推注药液。如果遇到阻力,应立即停止操作,重新进针,以免损伤小鼠。
四、注意事项
1. 药物配制
在进行小鼠灌胃给药时,要选择合适的药物配比和剂量,避免药物过量或过强对小鼠造成伤害。药物的配制需要根据实验要求、小鼠的身体状况等因素来确定。例如在验证马齿苋多糖对糖尿病小鼠的作用实验中,就需配置不同浓度的马齿苋多糖溶液。
2. 操作轻柔
灌胃操作过程中要避免对小鼠造成伤害,细心操作防止灌胃针插入不当。进针时要动作轻柔,从小鼠嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进。抓取小鼠时若一次不顺手,应放开重新抓,避免逞强操作。在整个过程中,要注意小鼠的反应,若其挣扎厉害,说明可能插错位置或操作不当,应马上停止进针或将针拔出,待动物恢复平静后再次尝试。
3. 清洁消毒
保持灌胃针清洁和消毒,避免细菌感染和交叉感染。小鼠灌胃针可以重复使用,但需要进行消毒。消毒方法有多种,如用酒精、高锰酸钾、紫外线等。在使用前,需对灌胃针进行消毒处理,确保其卫生和无菌。
4. 测定小鼠状况
操作前先测定小鼠身体状况,确保健康,避免灌胃操作中伤害小鼠。选择体重在 20 - 30g 之间、健康的小鼠进行灌胃操作。在操作前,可将小鼠放置在灌胃台上,尽量保持其镇静和稳定,同时清洁小鼠鼻孔和口腔,以防止灌胃时出现异物或分泌物。
5. 观察小鼠
灌胃后及时观察小鼠身体状况,确保无异常情况。灌胃结束后,及时将小鼠放回其饲养箱内,并观察其恢复情况。注意监测小鼠的进食、水分摄入和体重变化。