细胞侵袭

应用简介

肿瘤细胞通过膜表面特定受体与基质或基底膜的层粘连蛋白、纤维连接蛋白和IV型胶原等相粘连，然后肿瘤细胞可释放蛋白水解酶或激活基质中已存在的酶原，使基质成分降解，最后肿瘤细胞运动而充填到被水解了的基质的空隙处，如此三个过程不断重复肿瘤细胞不断向深层侵袭。

技术原理

本实验采用的Matrigel是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原等。将Matrigel铺在Transwell侵袭小室的多孔滤膜上，能形成与天然基底膜极为相似的基底膜结构。具有侵袭能力的细胞在趋化剂诱导下可穿过多孔滤膜，侵袭细胞经染色后，在显微镜下观察和计数。

实验方法

注意事项

1、照相前一定要晾干，照相时将小室正置于载玻片上，在倒置显微镜下观察、照相。

2、使用Matrivgel前应从-20℃转移至4℃待其自然溶化（如过夜放置），避免反复冻融。

3、使用时需接触Matrivgel的试管、移液吸头等均应预冷于4℃。

4、使用Matrivgel时注意无菌操作。